冷冻和复温方法对血液样本RNA质量的影响

更新时间:2022-07-07 14:50:00  浏览次数::329

继去年在国际生物及环境样本库协会(ISBER)官方杂志《Biopreservation and Biobanking》上发表了一篇关于组织样本RNA保藏的研究论文后,今年6月,我院样本库团队再次在该杂志上发表了一篇关于血液样本RNA保藏的研究论文,题为“Effects of Freezing and Rewarming Methods on RNA Quality of Blood Samples”。该研究分析了样本的预处理、冷冻程序和复温方法对血液样本RNA质量的影响,探讨出更合适的血液样本保藏方法以便获得高质量RNA,为后续研究分析的可靠性提供保障。


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血液是生物样本库中最常见的样本类型之一。从血液中提取出的RNA可用于广泛的科学研究及临床试验,如实时定量聚合酶链反应、转录组测序和基因阵列分析等。然而,RNA在血液样本的运输、储存和提取过程中容易降解,所以如何更好地保存血液样本并提取到高质量RNA是至关重要的。

样本库团队先将家兔血液样本分为全血(Whole Blood, WB)和血细胞(Blood Cell Components, BCC)两组,分别采用四种具有代表性的冷冻保存方法对两组样本进行降温冻存,然后通过两种复温方法(4℃和涡旋)对冷冻样本进行复温,用安捷伦生物分析仪测量RIN值(RNA Integrity Number)以评估各组样本RNA的完整性,最后使用人血样本对最佳方法进行验证。


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研究发现,对于这四种不同的冷冻程序,血液样本RNA的完整性并没有显著性差异,但血液成分和复温方法会影响血液样本的RNA质量。其中,对于已被冻存的全血样本,涡旋复温是获得高质量RNA的最佳方法;而对于有样本预处理条件的样本保存点,通过离心去除血浆,将血液样本以血细胞的形式冷冻保存,可以获得更纯净、更稳定的RNA。

样本库及样本科学领域近年来高速发展,已有很多杂志收录相关的研究论文。《Biopreservation and Biobanking》是第一个全面涵盖生物样本采集、处理、保藏、分配和使用的同行评议期刊。该期刊发表了一系列原创文章,重点关注当前生物样本保藏中的挑战和问题,以及生物大分子、细胞和组织保藏相关问题的研究进展,一直受到样本库专业人士的关注。